제 1 일
◆ 배양실 견학 9
○ 먼저 전실에 들어간다 11
○ 무균실에 들어간다 14
◆ 실습 1 배지교환 21
해설 처음부터 자신이 스스로 생각하여 행하는것의 장 단점
Step1 전실에서의 준비 24
Step2 무균실에 들어간다 25
해설 쓰레기 처리
Step3 클린벤치의 준비 26
해설 살균등을 켠 채로 작업하면 어떻게 될까
Step4 필요한 것을 클린벤치에 넣는다 28
해설 병의 화염 멸균법
Step5 세포를 꺼낸다 31
해설 트레이를 운반할 때의 주의
Step6 디쉬(dish)의 관찰 32
해설 배지색은 중요 (pH 지시약으로서의 Phenol red)
Step7 배지를 교환하기 위해 배지를 흡인해 낸다 34
해설 피펫을 버리는 통에 대하여/클린벤치내에서의 조작에 대하여
Step8 배지를 첨가한다 38
해설 배지의 관리/배지를 흘렸을 경우
Step9 Dish를 수납한다 42
Step10 마지막 정리 43

제 2 일
◆ 실습 1 세포 계대 48
Step1 전준비 52
해설 PET을 녹이는 방법/왜 Lot번호까지 기록해야만 하는가
Step2 무균실에 들어간다 53
해설 새로운 dish를 꺼내는 법
Step3 세포를 꺼낸다 54
해설 사전에 관찰한 후에 실험을 시작해야만 한다
Step4 계대한다 55
해설 현미경에서의 관찰/분리된 곳과 분리되지 않은 곳의 분별법/희석에 대하여/균일하게 분산시키기 위해서는/계대는 최소한 2장의 dish에 배양한다
◆ 실습 2 세포수를 계산한다 63
실습 2-1 나핵하여 세포수를 카운트(count)한다 64
Step1 핵현탁액 만들기 66
해설 Rubber Policeman의 사용법/Aspiration법/Crystal violet용액에 대하여
Step2 세포수의 계산법 68
해설 카운트법(count)/ 어지러움을 느끼는 사람이 적지 않다
실습 2-2 핵을 나핵하지 않고 세포수를 카운트한다 72
○ 현탁 세포를 그대로 카운트한다 72
○ 생세포를 카운트한다 73
해설 혼합한 다음 어느 정도의 시간이 경과하면 염색될까, 어느 정도의 시간까지 유지될까/생 세포, 죽은 세포의 구별법
실습 2-3 dish에서 자라고 있는 세포를 직접 카운트한다 76

제 3 일
◆ 실습 1 세포현탁액의 정확한 분주 79
○ 분주방법 80
Step1 세포현탁액 만들어 분주한다 82
Step2 세포를 카운트한다 84
해설 일반적인 현탁법
◆ 실습 2 적은수의 세포분주(Colony 형성) 86
◆ 실습 3 Colony의 Giemsa염색 89
Step1 고정 91
Step2 염색 92
Step3 관찰 93
해설 colony를 카운트한다/현미경에서의 관찰에 대하여

제 4 일
◆ 실습 1 Multi-well plate에 분주한다 100
Step1 Cover glass를 multi-well plate에 넣는다 104
Step2 세포를 분주한다 105
해설 분주법에 대하여
◆ 실습 2 세포의 Cloning 107
해설 어떤 colony를 선택할 것인가/필요한 colony에 표시한다/세포가 건조되지 않도록/몇 개정도의 colony를 선택 할 것인가

제 5 일
◆ 실습 1 증식곡선을 그린다 115
해설 암세포와 transform 세포
○ 실례 1: 약간 심하게 들릴지도 모르겠지만, 우등생다운 하나의 실례 122
○ 실례 2: 있을법한, 그러나 있으면 곤란한 하나의 실례 143
◆ 실습 2 응용 실습 145
○ Cover glass에 배양한 세포의 취급 145
해설 Cover glass상의 세포 washing법/Cover glass를 배양용기에서 꺼내어 고정하는 경우
실습 2-1 DNA 염색 146
실습 2-2 항체염색 148
실습 2-3 방사성 동위원소로 표식한다 153
해설 Thymidine을 팁으로 첨가할때의 요령/ 표식된 thymidine의 산출법

공통실습
◆ 실습 1 배양실 청소 157
◆ 실습 2 Autoclave 158
◆ 실습 3 건열멸균 161
◆ 실습 4 여과멸균 161
○ 수십 ml까지의 여과 162
○ 수백 ml에서 수 L정도의 여과 164
○ 대량의 용액 (100 ml부터 10L까지) 여과 165
◆ 실습 5 유리피펫의 세정과 멸균 165
Step1 피펫의 세정 165
Step2 피펫의 준비 166
Step3 건열멸균 166
해설 왜 솜으로 막는가
◆ 실습 6 Incubator 청소 168
◆ 실습 7 배지를 만든다 169
◆ 실습 8 Trypsin/EDTA를 만든다 172
◆ 실습 9 혈청을 불활성화 한다 173
해설 혈청의 불활성화법
◆ 실습 10 세포를 동결보존한다 175
◆ 실습 11 동결세포의 해동 181
해설 동상에 대한 주의/폭발에 대한 주의/해동법: 액체질소가 없어지면 가능한 한 빨리 해동시킨다
◆ 실습 12 Mycoplasma의 검출 183
○ 공통실습을 통하여 185
부록: 기입식 protocol 186
색인 212